shkolageo.ru   1 2 3

ЗАКЛЮЧЕНИЕ


В целом, сравнительные исследования нетрансформированных и трансформированных эпителиоцитов IAR показали, что неопластическая трансформация эпителиальных клеток ведёт к значительной реорганизации актинового цитоскелета, тесно связанных с ним АК и, как следствие, к разрушению стабильной межклеточной адгезии. При трансформации эпителиальные клетки утрачивают краевой актиновый пучок, а стабильные тангенциальные АК заменяются динамичными радиальными АК. Можно предположить, что отличия между тангенциальными и радиальными АК, образованными Е-кадхерином, связаны, прежде всего, с различиями во взаимодействии АК нетрансформированных и трансформированных эпителиоцитов со структурами актинового цитоскелета. При формировании тангенциальных АК нетрансформированных эпителиоцитов играет роль полимеризация F-актина, регулируемая mDia1 и Rac. В то же время формирование радиальных АК трансформированных эпителиоцитов определяется их взаимодействием с актин-миозиновыми пучками, контрактильность которых регулируется ROCK.

По итогам настоящей работы сформулирована гипотеза, предполагающая, что перестройка тангенциальных АК эпителиальных клеток в радиальные АК во время неопластической трансформации определяется реорганизацией актинового цитоскелета, приводящей к изменениям в направлении натяжения в зоне межклеточного контакта. Исчезновение краевого актинового пучка в эпителиальных клетках при трансформации является ключевым событием, приводящим к перестройке АК. В трансформированных клетках отсутствие тангенциального натяжения в зоне межклеточного контакта препятствует развитию контактного паралича, а наличие центростремительного натяжения приводит к сборке прямых актиновых пучков и образованию радиальных АК, которые гораздо динамичнее и менее стабильны, чем тангенциальные АК нетрансформированных эпителиальных клеток. Такие контакты могут играть важную роль в коллективной миграции трансформированных эпителиоцитов. Изменения в активности малых ГТФаз семейства Rho, которые характерны для трансформированных клеток, также могут вносить вклад в перестройки АК и актинового цитоскелета. Таким образом, настоящая работа демонстрирует то, что структурная и динамическая координация между кадхеринами, актиновыми структурами и актин-регулирующими белками может изменяться при неопластической трансформации эпителиальных клеток.



ВЫВОДЫ


1. При исследовании эпителиоцитов линии IAR-6-1, трансформированных диметилнитрозамином, впервые обнаружено, что неопластическая трансформация клеток эпителиального происхождения может вызывать перестройку пространственной организации E-кадхерин-содержащих межклеточных адгезионных контактов (АК): превращение тангенциальных АК, ассоциированных с периферическим актиновым пучком, в радиальные АК, связанные с прямыми актиновыми пучками и ориентированные перпендикулярно межклеточной границе.


2. При неопластической трансформации реорганизация АК и актинового цитоскелета сопровождается разрушением стабильной межклеточной адгезии: E-кадхерин-содержащие АК трансформированных эпителиоцитов IAR-6-1 являются динамичными структурами и претерпевают постоянный ремоделинг.


3. АК нетрансформированных и трансформированных эпителиоцитов формируются по-разному. Начальные точечные АК нетрансформированных эпителиальных клеток претерпевают латеральное расширение и формируют зрелый тангенциальный АК вдоль межклеточной границы. В случае трансформированных эпителиоцитов, начальные точечные АК увеличиваются в размере и превращаются в индивидуальные радиальные АК.


4. Формирование АК в нетрансформированных и трансформированных эпителиоцитах IAR требует активности малой ГТФазы Rho.


5. Формирование тангенциальных АК нетрансформированных эпителиальных клеток IAR-2 зависит от эффектора Rho mDia1 и не зависит от активности ROCK, другого эффектора Rho. Формирование радиальных АК трансформированных эпителиальных клеток IAR-6-1, напротив, не зависит от mDia1, но требует активности ROCK и индуцируемой ею контрактильности актина-миозина.

6. Формирование тангенциальных АК нетрансформированных эпителиальных клеток IAR-2 зависит от активности малой ГТФазы Rac. Напротив, формирование радиальных АК трансформированных эпителиальных клеток IAR-6-1 может происходить и в условиях ингибирования активности Rac.



Список работ, опубликованных по теме диссертации

Статьи в журналах, соответствующих Перечню ВАК:

1. Ayollo D.V., Zhitnyak I.Y., Vasiliev J.M., Gloushankova N.A. Rearrangements of the actin cytoskeleton and E-cadherin–based adherens junctions caused by neoplasic transformation change cell–cell interactions. // PloS ONE. – 2009 – V.4-11 – e8027.


Тезисы конференций:

1. Айолло Д.В. Роль генов Rho семейства малых ГТФ-аз в регуляции формирования межклеточных адгезионных контактов. // Тезисы докладов XIII международной конференции студентов, аспирантов и молодых ученых «Ломоносов-2006». –Москва, 2006 – C. 8.

2. Глушанкова Н.А., Айолло Д.В., Васильев Ю.М. Межклеточные адгезионные контакты эпителиальных клеток и фибробластов: особенности образования и регуляции. // Тезисы докладов и сообщений Всероссийского симпозиума «Биология клетки в культуре». – Санкт-Петербург. – Цитология. – 2006 – Т.48 №9 – С. 755.

3. Айолло Д.В., Глушанкова Н.А. Различные типы организации и регуляции межклеточных адгезионных контактов в эпителиоцитах и фибробластах. // Тезисы 13-й международной школы-конференции молодых учёных «Биология наука XXI века». – Пущино, 2009 – С. 88

4. Айолло Д.В., Глушанкова Н.А. Формирование, организация и регуляция различных типов межклеточных адгезионных контактов эпителиальных клеток и фибробластов. // Тезисы школы-семинара по проблемам организации внутриклеточного транспорта, цитоскелета и путей передачи сигнала. – Санкт-Петербург, 2009– Цитология. – 2010 – Т. 52 №3 – С. 254

5. Gloushankova N.A., Ayollo D.V., Zhitnyak I.Y. Rearrangements of the actin cytoskeleton and E-cadherin-based adherens junctions disrupt cell-cell adhesion of transformed epithelial cells. // Сборник тезисов международного симпозиума "Biological motility: from fundamental achievements to nanotechnologies". – Пущино, 2010 – С. 96-97.




<< предыдущая страница